获思茅地区科技进步一等奖

获奖者：朱兆鸿

云南省疟疾防治研究所

 

云南省是我国恶性疟流行的主要地区之一，恶性疟流行分布面广，特别是与缅甸、老挝接壤的边境县，恶性疟流行更为严重，随着抗疟工作的不断深入， 抗氢喹恶性疟原虫的分布日趋扩散，不仅抗性率高（85%以上）且抗性程度均在不断上升，严重地阻碍了灭疟工作的进展。为研究氯喹抗药性的药物配伍，筛选新的抗疟药及免疫诊断提供同种抗原的需要，于1983年7月在思茅当地由一名恶性疟患者血中分离外一株恶性疟原虫，按照Trager等的蜡烛缸法进行培养，培养液采用RPMI1640培养液加人血清培养， 起始原虫感染率为1%，经培养20小时后原虫发育为滋养体和裂殖体，第5天密度明显上升并作两次稀释。20天出现死虫，原虫率下降，但疟原虫形态正常， 仍可查见少量裂殖体。第31天取一皿采用免血清与人AB血清同时培养，原虫寄生率分别为3.3%、3.2%，用人血清第40天原虫平均寄生率为1.4%、50天为0.35%，60 天上升，开始上升为5. 5%，70天达9.4%；使用免血清原虫寄生率一直在较低水平，70天为零，90天才开始上升至3.6%，120天达6%。，连续培养15天和64天的培养物放入液氯冰冻6-79天， 复苏培养反复4次均获得成功，原虫生长良好，寄生率达20%左右。在103─201天经反复冰冻复苏培养,作了6次体外微测，（氯喹测定板由中国预防医学科学院上海寄生虫病研究所提供）按氯喹抗性标准判定属抗氯喹恶性疟原虫株。

驯化一株恶性疟原虫使其适应体外培养环境，并能迅速发育繁殖，需要两个月左右的时间才能稳定， 为了证实本株恶性疟已适应体外培养将培养物反复冷冻多次均显示原虫率能迅速上升，且原虫寄生率达20%。与北京、上海生物研究所和第二军大的体外连续培养的寄生率相似。此株恶性疟原虫抗性株的培养成功将对研究氯喹抗性的药物配伍及筛选新抗疟药物提供虫源，在我省首次建立了恶性疟抗性株原虫。

 

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